1. 预期用途

参考试剂由世界卫生组织 (WHO) 生物标准化专家委员会于 2019 年设立，是世界卫生组织 (WHO) 第一个用于慢病毒载体 (LV) 整合位点分析的国际参考试剂 (RR)。

编码安瓿（NIBSC 代码 18/144）包含从人体细胞中提取的冷冻干燥、纯化的基因组 DNA。该材料由外部实验室测试，显示适合作为 LV 整合位点分析的定性参考试剂，对十个定义的 LV 整合位点有信心检测（表 1）。此参考试剂不得用于任何其他目的。数据分析必须集中在慢病毒载体整合上。

2. 注意

该制剂不适用于人类食物链中的人类或动物。

该制剂含有人类来源的材料，最终产品或从中提取的原材料都经过测试，发现 HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈阴性。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

NIBSC 18/144 慢病毒载体整合位点(标准品）

3. 单元

参比试剂在一项涉及来自 13 个国家的 31 个实验室的国际合作研究中进行了测试。从最一致的结果中获得了一致的十个 LV 整合位点。并非所有的集成站点都必须被报告。集成站点的数量是作为信息的参考值提供的，而不是作为正式分配的单位

4。内容 生物材料原产国：英国。

参考试剂含有大约 5 µg 从人类细胞系中提取的冷冻干燥和纯化的基因组 DNA。使用“盐析”方法提取基因组 DNA，并在冷冻干燥前用 5mg/mL 海藻糖在 Tris-EDTA 缓冲液中稀释。

5. 存储

将所有未开封的冻干材料安瓿存放在 -20°C 或以下。

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

NIBSC 18/144 慢病毒载体整合位点(标准品）

6. 开瓶指南

DIN 安瓿瓶有一个“易开”的彩色应力点，其中狭窄的安瓿杆与较宽的安瓿瓶身相连。各种类型的安瓿破碎机可商购获得。要打开安瓿，轻轻敲击安瓿以收集底部（标记）端的材料，并按照安瓿破碎器随附的制造商说明进行操作。

7. 材料的使用

在重新配制之前，不应尝试称量冻干材料的任何部分

a。如上文第 6 节所述打开安瓿瓶。

b。在室温下重构冻干材料，例如无核酸酶水。

C。让材料在室温下重构 1 小时，然后吸管充分混合。

d。使用移液器将样品转移到无核酸酶管中，确保收集到最大可用体积。

e.重组后，例如200µL/安瓿，无核酸酶水，根据 QuBit 在含有 5mg/mL 海藻糖的 Tris-EDTA 缓冲液（10mM tris，1mMEDTA）中的定量，材料的 gDNA 浓度约为 25ng/µL。不必担心材料中可能出现的白色斑点。

F。能够检测十个定义的 LV 集成站点，以验证最终用户的 LV 集成站点分析研究协议。