WHO世界卫生组织国际标准

NIBSC 18/164，ATDB102 参考基因组（第一国际标准）

1. 预期用途

NIBSC 18/164 ATDB102 参考基因组是从 ATDB102 人类细胞系中提取的冷冻干燥、纯化的基因组 DNA (gDNA)。该材料已被证明是 PIK3CA c.1633G>A (E545K)、TP53 c.916C>T (R306*)、NRAS c.34G>T (G12C)、PTEN c.795delA (K267fs*9) 的野生型和 MAP2K1/MEK1 c.199G>A (D67N) 变体，并且是 PIK3CA、TP53、NRAS、PTEN、MAP2K1/MEK1 的纯合野生型。该材料可用作 HCT 15 和 MOLT-4 癌症基因组（NIBSC 材料代码 18/118 和 18/130）第一国际标准 2019 中上述变体的通用参考和稀释剂。材料 18/118 和 18/130 的使用说明中提供了有关如何使用该材料作为稀释剂的详细信息。该材料旨在用作校准二级标准、试剂盒和分析的一级标准。该材料不用作运行控制。该材料由外部实验室测试，显示适合作为下一代测序 (NGS) 和数字 PCR (dPCR) 的标准。该材料还包含可用于验证 NGS 检测的非临床相关变体（参见附录 I）。该材料由世界卫生组织 (WHO) 生物标准化专家委员会于 2019 年制定为 WHO 第一个 ATDB102 参考基因组国际标准，NIBSC 材料代码 18/164。

2. 注意

NIBSC 18/164 ATDB102 参考基因组制剂不适用于人或动物给药。

用于制备该材料的细胞系经过检测，经 PCR 检测，支原体、HIV1、HTLV1、HBV 和 HCV 均呈阴性。该细胞系是 Epstein Barr 病毒 (EBV) 转化的淋巴母细胞系。 EBV 是英国危险病原体咨询委员会分类的第 2 类病原体。 EBV 序列可能存在于这些材料中，但 DNA 是使用变性和去除蛋白质的协议制备的，因此可能使病毒失活。但是，无法消除活病毒存活的可能性。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括佩戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心操作，以避免割伤。

3. 统一

NIBSC 18/164 ATDB102 参考基因组在一项涉及 35 个实验室和 38 种测试方法的国际合作研究中进行了测试。基因型是从 NGS 和 dPCR 获得的（表 1）。

4. 制备

生物材料原产国：英国。

编码安瓿含有大约 5µg 冻干、纯化的基因组 DNA，从 ATDB102 人类细胞系中提取。 使用“盐析”方法提取 gDNA，并在冷冻干燥前在含有 5mg/ml 海藻糖的 Tris-EDTA 缓冲液中稀释。

5. 储存

将所有未开封的冻干材料安瓿储存在 -20°C 或以下。 请注意：由于冻干材料的固有稳定性，NIBSC 18/164 ATDB102 参考基因组可能会在环境温度下运送这些材料。