ERM-AD624 李斯特菌单核细胞基因琼脂糖插头每个单元包括一个小瓶，包含一个琼脂糖塞，为PFGE嵌入未消化的单核增生李斯特菌DNA。这些插头是由欧盟委员会的联合研究中心负责生产和认证的。以单核增生李斯特菌H2446作为生产塞的起始原料。这些插塞储存在含有TRIS-EDTA缓冲溶液的微瓶中。

使用说明

ERM-AD624 李斯特菌单核细胞基因琼脂糖插头用于质量控制和/或方法性能评估。与任何参考材料一样，它可以用于建立控制图或验证研究。请注意，该材料的认证值是使用如下所述的PFGE李斯特菌协议获得的。遵循不同的PFGE协议可能会产生不同的频带模式，从而产生不同的结果。

限制前孵育

-将塞放于100µL 1倍浓缩限制性内切酶(RE)缓冲溶液中，37±1°C孵育10 min。

消化琼脂糖塞

-抽吸RE缓冲液，加入含有5个单位AscI酶的100µL RE缓冲液，确保塞*浸泡。-在37±1°C的干浴中孵育4小时。

PFGE消化片段

-将0.5x TBE缓冲溶液(44.5mM三硼酸盐；1mMEDTA，pH 8.3)倒入电泳室，打开蠕动泵，将冷水机设置为14°C。-用0.5x TBE制备1%(w/v)海带金琼脂糖(SKG)琼脂糖，并保持在50ºC直到使用。-吸入酶溶液，在试管中加入200µL 0.5x TBE，室温孵育5 min。-将梳子放在台顶，并将塞子装入梳子齿的底部。-将塞子放在梳子上干燥3 min，用一滴1%(w/v)SKG琼脂糖溶液密封。-将梳子放置在凝胶托盘中，以确保插头的下边缘正确地与框架对齐。-将琼脂糖溶液小心地倒入凝胶托盘中，让凝胶凝固30 min。-取出梳子，用1%(w/v)SKG琼脂糖溶液填充孔，并使其凝固。

储存

ERM-AD624 李斯特菌单核细胞基因 琼脂糖插头材料应储存在4±3°C。然而，欧洲委员会不能对材料在客户的场所储存期间发生的变化负责，特别是对打开的样品。