EURM-019 SARS-CoV-2 的单链 RNA标准品旨在用于检测冠状病毒SARS-CoV-2的阳性质量控制样本，也称为2019--nCoV或导致covid--19疾病的病毒。可用于验证附件1中所列的SARS-CoV-2实时RT-PCR检测的转录和扩增步骤的正确性。

EURM-019是一种在缓冲液中含有稳定的体外转录(IVT)合成单链RNA(ssRNA)的溶液。它不含任何可活的病毒。

IVT RNA参考序列SARS-CoV-2的扩增子大小和位置以及IVT RNA序列见附件1和2。JRC检测针对的是编码多碱基切割位点PRRAR的刺突蛋白[21563-25384]区域，该区域以前在相关系B乙型冠状病毒中未观察到，是SARS-CoV-2[1]的一个独.特特征。使用热核苷酸爆炸2.04软件程序[2]，对NCBI的48个完整的2019冠状病毒基因组，包括参考MN908947和151个完整的GISAID基因组进行PCR模拟，以检测该方法的特异性。

使用说明

遵循世卫组织建议的所有诊断实验室工作和PCR分析的生物安全2级(BSL-2)措施。阳性对照材料由病毒基因组的非传染性部分组成。在BSL-2设备中使用这种材料的原因是为了保护材料免受污染，并保持材料的质量。

根据BSL-2指南，使用手套在II类生物安全柜下处理和打开小瓶。

工作表面在使用前必须进行去污。

由于实时RT-PCR的敏感性，检测应采用严格的质量控制和质量保证程序进行。遵循这些指南将有助于最小化假阳性扩增的可能性。

为了使EURM-019 SARS-CoV-2 的单链 RNA准备好使用，小瓶的内容物必须完全解冻，通过翻转小瓶几次轻轻混合，短暂旋转以在管底部收集溶液，解冻时保持在4°C。应避免多次重复的自由循环。一个小瓶中含有大约100µL的RNA溶液。在BioRadAQX200中通过数字RTPCR检测，优化的测试条件见附件4。测试了瓶之间的变化。相应的相对标准偏差为0.2%，证实了该材料足够均匀，可以作为阳性对照。

存储

EURM-019 SARS-CoV-2 的单链 RNA标准品应在接收时和使用前在-20°C±5°C的黑暗中存储。如果准备了稀释的等分物，它们应保持在-70°C或以下。请注意，欧盟委员会不能对在客户的办公场所存放材料期间发生的变化负责，特别是对打开的小瓶。